南美胎牛血清使用方法: 在細胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,常使用的胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,我們在實驗中使用10%的胎牛血清培養(yǎng)293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據(jù)具體細胞選擇合適的胎牛血清濃度。
南美胎牛血清作用:
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
7.內(nèi)毒素極低,其次無菌過濾,三次為0.1um無菌過濾處理。
8.進行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協(xié)會要求
9.建議使用范圍:科研使用,細胞培養(yǎng)
10.儲存:-20℃凍存,避免反復(fù)凍融,4°C保存不超過1個月。反復(fù)凍融會破壞血清中有效成 分,影響血清品質(zhì)
南美胎牛血清適用于以下用途
**培養(yǎng)基添加
*常規(guī)類型細胞培養(yǎng)適用
*診斷試劑的穩(wěn)定
*材料表面封閉
*胰蛋白酶滅活
儲存條件:血清一般儲存于-20℃,同時應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲存于-20℃,使用前融化。融化時現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長時間存放,應(yīng)盡快使用。
南美胎牛血清使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細胞系,迅速生長之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。